Je, kinachohusiana na mchanganyiko wa aina ya Polymerase (PCR) ni nini?

PCR inasimama mmenyuko wa mnyororo wa polymerase , mbinu ya biolojia ya molekuli kwa kuimarisha makundi ya DNA, kwa kuzalisha nakala nyingi kwa kutumia enzymes DNA polymerase chini ya hali ya kudhibitiwa. Kama kidogo kama nakala moja ya sehemu ya DNA au jeni inaweza kuunganishwa katika mamilioni ya nakala, kuruhusu kugundua kwa kutumia rangi na mbinu nyingine za taswira.

Iliyoundwa mwaka wa 1983, mchakato wa PCR imefanya iwezekanavyo kufanya ufuatiliaji wa DNA na kutambua utaratibu wa nucleotides katika jeni binafsi.

Njia hutumia baiskeli ya joto au inapokanzwa mara kwa mara na baridi ya majibu ya DNA ya kuyeyuka na replication. Kama PCR inavyoendelea, DNA "mpya" hutumiwa kama template ya kujibu na mchanganyiko wa mchanganyiko wa mnyororo, kwa kupanua kwa kiasi kikubwa template ya DNA.

Mbinu za PCR zinatumika katika maeneo mengi ya teknolojia ya kibayoteknolojia ikiwa ni pamoja na uhandisi wa uhandisi , cloning, forensics (DNA fingerprinting), kupima kwa uzazi, ugonjwa wa urithi na / au magonjwa ya kuambukiza, na uchambuzi wa sampuli za mazingira.

Katika forensics, hasa, PCR ni muhimu hasa kwa sababu inaongeza hata kiasi kidogo kabisa cha ushahidi wa DNA. PCR pia inaweza kutumika kuchambua DNA ambayo ni maelfu ya miaka, na mbinu hizi zimetumiwa kutambua kila kitu kutoka mammoth ya umri wa miaka 800,000 hadi mummies kutoka duniani kote.

Utaratibu wa PCR ni kama ifuatavyo:

• Initialization: Hatua hii ni muhimu tu kwa DNA polymerases ambazo zinahitaji moto-kuanza PCR. Mmenyuko huwaka kati ya 94 na 96 ° C na uliofanyika kwa dakika 1-9.

• Denaturation: Ikiwa utaratibu hauhitaji kuanzisha, denaturation ni hatua ya kwanza. Mmenyuko huwaka hadi 94-98 ° C kwa sekunde 20-30. Vifungo vya hidrojeni ya template ya DNA vinavunjwa na molekuli za DNA moja zilizopigwa zinaundwa.
• Annealing: joto la mmenyuko ni la chini kati ya 50 na 65 ° C na limefanyika kwa sekunde 20-40. Vipindi vinavyotokana na template ya DNA moja iliyopigwa. Joto ni muhimu sana wakati huu. Ikiwa ni moto sana, msimbishaji hauwezi kumfunga. Ikiwa ni baridi sana, primer inaweza kumfunga bila ukamilifu. Dhamana nzuri hupangwa wakati mlolongo wa kwanza unalingana na mlolongo wa template.

• Ugani / Kipindi: joto wakati wa hatua hii inatofautiana kulingana na aina ya polymerase. DNA polymerase huunganisha DNA mpya kabisa.
• Kipindi cha mwisho: Hatua hii inafanyika saa 70-74 ° C kwa dakika 5-15 baada ya mzunguko wa mwisho wa PCR.
• Kushikilia mwisho: Hatua hii ni ya hiari. Joto huhifadhiwa saa 4-15 ° C na hupunguza majibu.

Utaratibu umegawanywa katika hatua tatu:

• Kipaumbele kinachofaa: Wakati wa mzunguko, bidhaa (kipande maalum cha DNA ambacho kinaelezwa) ni mara mbili.
• Hatua ya kuondokana: Kama DNA polymerase inapoteza shughuli na hutumia reagents, mmenyuko hupungua.
• Sanduku: Hakuna bidhaa zaidi inayojilimbikiza.