Kupima Kinetics ya Enzyme
Kama kidogo ya asili, enzymes ni protini ambazo hufanya kama kichocheo katika kupunguza kiasi cha nishati ya uanzishaji kwa majibu kutokea. Nishati ya uanzishaji ni nishati inayotakiwa kupata athari "imeanza" tangu athari nyingi hazifanyi haraka sana (au hutokea kabisa) ikiwa zinaweza kutosha.
Enzymes huchochea athari maalum kwenye tovuti fulani (inayojulikana kama tovuti inayofanya kazi) ambapo mitambo ya kugumua hufunga na kuguswa ili kuzalisha bidhaa. Substrates zina maeneo ya kazi ambayo ni maalum kwao tu ili hakuna vitu vingine vinavyofunga au kuguswa kwenye tovuti hiyo. Kama lock na ufunguo, kila enzyme itasaidia kichocheo moja tu maalum (na isipokuwa baadhi).
Shughuli maalum hutumiwa katika mbinu za kutengwa za protini ili kuonyesha asilimia ya utakaso. Ni muhimu kujua kitengo hiki wakati ununuzi wa enzymes ili kuonyesha hasa kiasi gani cha enzyme safi unayopata.
Wakati wa kupima kinetics ya enzyme (kiwango cha mmenyuko wa enzyme na substrate - au uso), shughuli maalum huelezwa kama kiasi cha substrate kibadilishaji (matokeo ya kichocheo), kwa protini ya mg katika maandalizi ya enzyme, kwa kitengo cha wakati.
Mfano wa shughuli maalum itakuwa:
- Shughuli maalum ya enzyme ya pekee ilipimwa kwa 150 umoles / min / mg protini kabla ya kusafishwa na umoles 800 / min / mg, baada ya utakaso.
Shughuli maalum ni kipimo muhimu cha usafi wa enzyme. Vipande tofauti vya enzyme safi wanapaswa kuwa na maadili sawa na hata kuondokana na suluhisho la enzyme mara nyingi watakuwa na maadili maalum ya shughuli hata kama kutakuwa na maadili tofauti ya shughuli za enzyme. Hii ni kwa sababu ya kuhesabu shughuli maalum, nambari (vitengo / ml) na denominator (mg / ml) huathiriwa sawa.
Shughuli maalum ni tofauti sana na shughuli, lakini hesabu ya shughuli maalum bado inategemea thamani ya shughuli. Hii ina maana kwamba thamani maalum ya shughuli itakuwa pia inategemea ufafanuzi wa kitengo cha enzyme.
Vigumu vya enzymes ambazo zina chini ya thamani ya shughuli maalum zinaweza kuwa na molekuli za enzyme ambazo zimebadilika au zinachanganywa na uchafu.
Mambo Yanayohusu Shughuli ya Enzyme
Inawezekana kwamba enzyme moja inaweza kuwa na maadili tofauti ya shughuli zilizopimwa wakati wa kipimo katika maabara tofauti (yaani, tofauti halisi katika shughuli za kipimo, sio tofauti tofauti zinazosababishwa na matumizi ya ufafanuzi wa kitengo tofauti).
Njia ya jaribio hufanyika (njia ya kupima kuchunguza usafi wa enzymes) itaathiri maadili ya kazi yaliyoripotiwa. Kwa mfano, enzymes kwa ujumla hufanya kazi zaidi kati ya joto la nyuzi 37 Celsius ikilinganishwa na nyuzi 20 Celsius, hivyo kama kipimo kinachofanyika kwa digrii 21 Celsius, maadili yatatofautiana na majaribio yaliyofanywa kwa joto la nyuzi 32 Celsius (kawaida , majaribio yanafanywa kwa joto kati ya digrii 20-37 Celsius).
Hivyo, ufafanuzi wa kitengo cha enzyme utaonekana vizuri kama kitengo cha 1 (U) ni kiasi cha enzyme kinachochea mmenyuko wa 1 nmol ya substrate kwa dakika chini ya hali ya kawaida.