Kuna stains kadhaa ambazo zinaweza kutumika kutazama na kupiga picha DNA baada ya vifaa vimejitenga na electrophoresis ya gel. Miongoni mwa uchaguzi wengi, aina hizi tano ni mwanzo wa kawaida na bromidi ya Ethidium, ambayo hutumika sana. Wakati wa kufanya kazi na mchakato huu, ni muhimu sio kujua tu tofauti kati ya matatizo lakini hatari za afya.
01 Bromidi ya Ethiamu
Bromide ya ethiamudi inaonekana kuwa rangi inayojulikana zaidi inayotumiwa kwa DNA kupima. Dae hii inaweza kutumika katika mchanganyiko wa gel, katika buffer ya electrophoresis au kutengeneza gel baada ya kukimbia. Molekuli ya rangi inaambatana na vipande vya DNA na fluoresce chini ya mwanga wa UV, kukuonyesha hasa ambapo bendi ni ndani ya gel. Licha ya manufaa yake, kikwazo ni kwamba ethidium bromide ni kansa ya uwezo, hivyo inapaswa kushughulikiwa kwa uangalifu mkubwa. Kwa sababu ya hatari ya afya ya kufanya kazi na gel hii, njia nyingine zimepatikana. 02 SYBR Dhahabu
Dhahabu rangi ya dhahabu inaweza kutumika kutengeneza DNA mara mbili au moja-stranded, au kutia RNA. Dhahabu ya SYBR ilikuwa mojawapo ya njia za kwanza za bromidi ya ethidium kuingia kwenye soko na inachukuliwa kuwa nyeti zaidi kuliko bromidi ya ethidium. Dye inaonyeshea fluorescence zaidi ya mara 1000 ya UV mara moja tu ikiwa inakabiliwa na asidi ya nucleic. Halafu huingia kwa kiwango cha juu cha asilimia ya agarose na inaweza kutumika katika gel formaldehyde. Kwa sababu fluorescence ya molekuli isiyojitokeza ni ya chini sana, kutayarisha haihitajiki. Mmiliki wa leseni Mimea ya Masi pia (tangu uzinduzi wa Dhahabu ya SYBR) imeendelezwa na kuuzwa SYBR Salama na SYBR Green ambayo ni njia salama kwa bromidi ya ethidium.
03 SYBR Green
The SYBR Green I na II stains (tena, kuuzwa na Probes Molecular) ni optimized kwa madhumuni mbalimbali. Kwa sababu wanafunga kwa DNA, bado wanafikiriwa kuwa na uwezo wa kuchanganya na kwa sababu hiyo, wanapaswa kushughulikiwa kwa uangalifu. SYBR Green Mimi ni nyeti zaidi kwa matumizi na DNA mbili-stranded, wakati SYBR Green II, kwa upande mwingine, ni bora kwa kutumia DNA moja au stranded au RNA. Kama stain maarufu ya Ethidium Bromide, hizi stains sana nyeti fluoresce chini ya mwanga UV. 04 SYBR salama
SHEF salama iliundwa kuwa mbadala salama kwa Bromide ya Ethidium na treni nyingine za SYBR. Sio kuchukuliwa kuwa taka ya hatari na inaweza ujumla kupitishwa kwa njia ya mifumo ya maji taka ya kawaida (yaani chini ya kukimbia), kwa sababu kupima sumu inaonyesha kuwa hakuna sumu kali. Upimaji unaonyesha pia kuna genotoxicity kidogo au hakuna kwenye seli ya Siri ya Hamster (SHE), lymphocytes ya binadamu, seli za lymphoma ya panya, na katika mtihani wa AMES. Taa inaweza kutumika kwa transilluminator ya bluu-mwanga ambayo husababisha uharibifu mdogo kwa DNA kuwa visualized na inatoa ufanisi bora kwa cloning baadaye. 05 Eva Green
Eva Green ni rangi ya kijani ya fluorescent ambayo imepatikana ili kuzuia PCR kwa kiwango cha chini kuliko rangi nyingine. Hii inafanya kuwa muhimu sana kwa programu kama PCR ya muda halisi. Pia ni chaguo nzuri ikiwa unatumia gel ya chini ya kiwango cha kupumzika kwa DNA. Ni imara sana katika joto la juu na ina fluorescence ya chini sana, lakini ni fluorescent yenye nguvu wakati imefungwa kwa DNA. Eva Green pia imeonekana kuwa na cytotoxicity ya chini sana au hakuna mutagenicity.