Vipindi hivi vinaweza kutumika kwa ajili ya maombi ya kibiolojia karibu na pH neutral
Maadili matatu ya pKa ya asidi ya fosforasi (kutoka kwa CRC Handbook ya Kemia na Fizikia) ni 2.16, 7.21 na 12.32. Phosphate ya monosodiamu na msingi wake wa kondomu, phosphate ya disodi hutumiwa kuzalisha vyuo vikuu vya pH karibu na 7, kwa ajili ya matumizi ya kibaiolojia, kama inavyoonyeshwa hapa.
Kufanya buffer hii ni vigumu zaidi kuliko kufanya matunda ya TAE na TBE. Sio ngumu sana, hata hivyo. Kwa kawaida. Inapaswa kuchukua muda wa dakika 10 ili kuwapiga buffer hii. Hapa ndivyo.
1. Chagua Mali ya Buffer
Kabla ya kufanya buffer, unapaswa kwanza kujua nini unataka kuwa, kiasi gani cha kufanya na nini pH inahitaji. Vipindi vingi hufanya kazi bora kati ya 0.1 M na 10 M. PH inapaswa kuwa ndani ya kitengo cha 1 cha pH cha pka ya asidi / conjugate. Kwa urahisi, hesabu hii ya sampuli itakuwa kwa 1 lita ya buffer.
2. Kuamua uwiano wa asidi na msingi
Tumia usawa wa Henderson-Hasselbalch (hapa chini) ili ueleze ni uwiano gani wa asidi ya msingi unahitajika ili ufanye buffer ya pH inayotaka. Tumia thamani ya pKa karibu na pH yako uliyotaka na uwiano utarejelea jozi ya conjugate ya asidi-msingi ambayo inalingana na pKa hiyo.
HH Equation: pH = pKa + logi ([Msingi] / [Acid])
Kwa buffer ya pH 6.9, [Base] / [Acid] = 0.4898
Kutoa kwa [Acid] na Tatua kwa [Msingi]
Molarity taka ya buffer ni jumla ya [Acid] + [Msingi].
Kwa buffer 1 M, [Msingi] + [Acid] = 1 na [Msingi] = 1 - [Acid]
Kwa kuingiza hii katika usawa wa uwiano, kutoka hatua ya 2, unapata:
[Acid] = 0.6712 moles / L
Tatua kwa [Acid]
Kutumia equation: [Msingi] = 1 - [Acid], unaweza kuhesabu kwamba:
[Msingi] = 0.3288 moles / L
3. Changanya msingi wa Acid na Conjugate
Baada ya kutumia usawa wa Henderson-Hasselbalch kuhesabu nini uwiano wa asidi na msingi unahitajika kwa buffer yako, kujiandaa tu chini ya 1 lita ya ufumbuzi kwa kutumia kiasi sahihi ya monosodium phosphate na disodium phosphate.
4. Angalia pH
Tumia suluhisho la pH ili kuthibitisha kuwa pH sahihi ya buffer imefikiwa. Kurekebisha kidogo kama inahitajika, kwa kutumia asidi ya fosforasi au hidroksidi ya sodiamu (NaOH).
5. Sahihi Volume
Mara pH inayotakiwa inapofikia, kuleta kiasi cha buffer hadi lita moja. Kisha kuondosha buffer kama unavyotaka. Buffer hiyo hiyo inaweza kupunguzwa ili kuunda buffers ya 0.5 M, 0.1 M, 0.05 M au chochote katikati.
6. Tips kwa Buffer
Kumbuka kwamba pKa haiwezi kupimwa kwa thamani halisi. Maadili tofauti yanaweza kupatikana katika vitabu kutoka vyanzo tofauti.
7. Unachohitaji
Ili kufanya buffer, utahitaji vitu vingine, wakati vifaa vilivyobaki ni vifaa. Dutu hii ni monosodium phosphate, phosphate disodium, na asidi ya fosforasi au hidroksidi ya sodiamu ili kurekebisha pH.
Utahitaji pia mita ya pH na uchunguzi na maabara sahihi. Hii inajumuisha chupa ya volumetric, mitungi ya kuhitimishwa, beakers na baa za kuchochea.
Hatimaye, utahitaji hotplate ya kuchochea.