Jinsi ya kufuta-Kavu Utamaduni wa Bakteria (Lyophilization)

Ufugaji, au kufungia kavu, ni utaratibu mfupi wa maabara

Kazi ya kukausha, ambayo pia huitwa lyophilization au cryodiiccation, ni mchakato wa kuondoa maji kutoka kwa bidhaa baada ya kuhifadhiwa (na kisha kuwekwa chini ya utupu) kuruhusu barafu kubadilisha kutoka kwa imara hadi mvuke, bila kuingia kwa awamu ya kioevu. Ice (au vimumunyisho vingine vya waliohifadhiwa) huondolewa kwenye bidhaa kwa njia ya mchakato wa upunguzaji wa maji na maji ya maji yaliyofungwa yanaondolewa kupitia mchakato wa desorption.

Msingi wa Lyophilization

Mojawapo ya njia bora za kuhifadhi bakteria, vimelea, chachu au nyingine za utamaduni kwa muda mrefu ni kutumia mchakato wa kufungia. Utaratibu huu mfupi wa maabara unaweza kufanywa na chombo chochote cha kufungia ambacho kitahifadhi ukusanyaji wako wa utamaduni. Kwa sababu lyophilization ni aina ngumu na ya gharama kubwa ya kukausha, mchakato kawaida huzuiwa vifaa vyenye maridadi, vya joto na thamani ya juu. Vitu ambavyo haviharibiki na kufungia inaweza kawaida kuwa lyophilized hivyo kuhifadhiwa kwa friji hakuna lazima.

Utaratibu huu unaweza kuchukua kidogo kama masaa matatu, na muda mrefu kama masaa 24, bila ikiwa ni pamoja na ukuaji wa utamaduni wakati.

Mchakato wa Hatua kwa Hatua ya Lyophilization

1. Kwanza, kukua utamaduni wa usiku, au lawn, ya microorganism juu ya LB au nyingine sahihi ya virutubisho agar sahani.

2. Kisha, jitayarisha vikombe vya kichwa vya kichwa vya kichwa kwa autoclaving kabla ya wakati, na kofia (vizuizi vya mpira) huwekwa kinyume cha juu. Weka maandiko ya karatasi yaliyochapishwa na kitambulisho cha utamaduni ndani ya zilizopo kabla ya autoclaving. Vinginevyo, tumia vijiko na kofia zilizotengenezwa kwa upole .

1. Ongeza buffer ya lyophilization 4 mL kwenye sahani. Ikiwa ni lazima, seli zinaweza kusimamishwa kwa kutumia fimbo yenye kioo.

2. Haraka kuhamisha utamaduni kusimamishwa kwa vilivyochapishwa. Ongeza takriban 1.5 mL kwa vial. Muhuri na kofia ya mpira.

3. Fungia utamaduni kusimamishwa ndani ya vikapu kwa kuweka vikapu katika digrii -20 digrii Celcius.

1. Mara tu tamaduni zimehifadhiwa, jitayarisha shimo la kufungia kwa kugeuza na kuruhusu wakati wa hali ya joto na utupu sahihi ili utulivu. Fanya hili kwa mujibu wa maelekezo ya mtengenezaji kwa aina fulani ya kufungia kavu unayotumia.

2. Kwa uangalifu, na aseptically, mahali vifuniko vilivyopigwa juu ya vifuniko, hivyo kwamba unyevu unaweza kuepuka wakati wa mchakato wa kukausha-kufungia, na uweke vikapu kwenye chumba cha kufungia. Omba utupu kwenye chumba kulingana na maelekezo ya mtengenezaji.

3. Ruhusu wakati wa utamaduni wa kupoteza kabisa (kavu). Hii inaweza kuchukua kutoka kwa masaa machache hadi usiku mzima kulingana na kiasi cha kila sampuli na jinsi sampuli ambazo unazo.

4. Ondoa sampuli kutoka kwenye chumba cha kufungia kavu kulingana na maelekezo ya mtengenezaji na mara moja muhuri majani na kofia za mpira, kisha vichwa vya ngozi.

5. Hifadhi ukusanyaji wa utamaduni lyophilized kwenye joto la kawaida.

Bidhaa Unayohitaji

• Funga kavu
• Vipande vilivyofaa au vingine vya agar (na incubator kukua utamaduni)
• Fimbo ya kioo
• Tampu ya lyophilization
• Vifuniko vya juu vya kichwa vya kichwa na vizuizi vya mpira (na mchezaji wa kutumia kofia)
• Freezer

<sub>Rejea:

SP Sayansi. Kanuni za Msingi za Kufuta kavu. http://www.spscientific.com/freeze-drying-lyophilization-basics/</sub>