Vectors Nini Wanapaswa Kufanya na Genes na Cloning
Katika cloning Masi, vector ni molekuli DNA ambayo hutumika kama carrier kwa ajili ya kuhamisha au kuingiza geni (s) za kigeni katika kiini kingine, ambapo inaweza kuwa replicated na / au walielezea. Vectors ni miongoni mwa zana muhimu za cloning ya jeni na ni muhimu sana ikiwa pia hutafuta aina fulani ya jenereta ya gene inayoelezea molekuli ya bioindicator ambayo inaweza kupimwa katika tathmini ya kibiolojia ili kuhakikisha kuingizwa, na kujieleza, katika viumbe vya jeshi.
Hasa, vector ya cloning ni DNA iliyotokana na virusi, plasmid au seli (za viumbe vya juu) kuingizwa kwa kipande cha DNA kigeni kwa ajili ya cloning. Tangu vector ya cloning inaweza kudumishwa vizuri katika viumbe, vector pia ina sifa zinazowezesha kuingizwa kwa urahisi au kuondolewa kwa DNA. Baada ya kuingizwa kwenye vector ya cloning, kipande cha DNA kinaweza kuwa cloned zaidi kwenye vector nyingine ambayo inaweza kutumika kwa hata zaidi ya maalum.
Katika hali nyingine, virusi hutumiwa kuambukiza bakteria. Virusi hivi huitwa bacteriophages, au phage, kwa muda mfupi. Retroviruses ni vectors bora kwa kuanzisha jeni katika seli za wanyama. Plasmids, ambazo ni vipande vya mviringo vya DNA, ni vectors ambazo hutumiwa kwa kawaida kutumika kuanzisha DNA ya nje katika seli za bakteria. Mara nyingi hubeba jeni za kuzuia antibiotic ambazo zinaweza kutumika kupima kwa kujieleza kwa DNA ya plasmid, kwenye sahani za petri za antibiotiki.
Gene kuhamisha kwenye seli za mimea hutumiwa kwa kutumia bakteria ya udongo Agrobacterium tumefaciens , ambayo hufanya vector na kuingiza plasmid kubwa ndani ya seli ya jeshi. Siri hizo pekee zilizo na vector ya cloning zitakua wakati antibiotics zipo.
Aina kubwa za Vectors vya Cloning
Aina sita kuu za vectors ni:
- Plasmid. DNA extrachromosomal DNA inayojitokeza ndani ya kiini cha bakteria. Kwa kawaida plasmids zina nambari ya nakala ya juu, kama vile pUC19 ambayo ina idadi ya nakala ya nakala 500-700 kila kiini.
- Upeo. Molekuli ya DNA ya mstari inayotokana na bacteriophage lambda. Inaweza kubadilishwa na DNA ya nje bila kuharibu mzunguko wa maisha yake.
- Cosmids. Mwingine molekuli ya DNA ya extrachromosomal ya mviringo inayochanganya vipengele vya plasmids na ukubwa.
- Chromosomes ya bandia ya bakteria. Kulingana na plasmids za mini-F za bakteria.
- Chachu ya Chromosomes ya bandia. Hii ni chromosome ya bandia yenye vidonge (vyema vya kutoweka kwenye mwisho wa chromosomes ambazo hukatwa wakati wa mgawanyiko wa seli) na asili ya replication, centromere ya chachu (sehemu ya chromosomu inayounganisha chromatidi dada au dyad), na alama inayochaguliwa kwa kitambulisho katika seli za chachu.
Chromosome ya Artificial Binadamu. Aina hii ya vector ni ambayo inaweza kuwa na manufaa kwa utoaji wa kiini katika seli za binadamu, na chombo cha tafiti za kujieleza na kuamua kazi ya kromosomu ya binadamu. Inaweza kubeba kipande kikubwa cha DNA.
Vectors wote walio na injini wana asili ya replication (replicator), tovuti ya cloning (iko ambapo kuingizwa kwa DNA ya kigeni haipatikani replication au inactivation ya alama muhimu), na marker selectable (kawaida jeni ambayo hutoa upinzani dhidi ya antibiotic.)